对外贸易促进霉菌毒素检测技术更新换代

——专访新加坡罗马实验室CEO Hannes BINDER博士

新加坡罗马实验室CEO Hannes BINDER博士

新加坡罗马实验室CEO Hannes BINDER博士（中）

与北京安普生化科技有限公司市场技术部经理张喆女士（左）接受本刊记者采访

      作为日常消费的大宗食品，粮油食品以及果汁饮料的霉菌毒素问题日益凸现，并受到业内人士的广泛关注。就霉菌检测的相关新技术、方法及发展趋势，本刊记者于2008年3月26日对致力于霉菌毒素检测的新加坡罗马实验室CEO Hannes BINDER博士进行了专访。

霉菌种类繁多 危害无处不在
      霉菌对食品和饲料的污染十分常见，除了引起变质外，还会产生具有“三致”（致畸、致癌、致突变）效应的霉菌毒素，不仅会使食品和饲料中的营养价值降低，还易导致人和牲畜中毒。据统计，每年全世界有25%的粮油作物污染霉菌菌毒素，联合国粮农组织估算由此造成的经济损失高达数千亿美元。
      粮油作物上的微生物可分两大类群，一类是田间微生物，即作物在田间生长时感染的微生物；另一类是贮藏微生物，即在粮食贮存期间产生，随着贮藏期的延长、粮情的稳定性下降而出现的微生物。前者主要是一些细菌和田间真菌，真菌主要包括酵母菌和各种霉菌。后者主要是一些贮藏真菌，包括各种青霉、曲霉。不同粮油作物在贮藏过程中产生的霉菌种类不同：稻谷、大米在贮藏期的真菌以黄曲霉最为常见，此外，还有灰绿曲霉、白曲霉、构巢曲霉和青霉；玉米、高粱贮藏真菌随着贮藏期的延长迅速增加，其中，玉米贮藏真菌增长速度明显快于高粱，尤其是混入碎玉米粒后霉菌增长最快。
      霉菌主要存在于粮油种子的外壳上，如最易感染黄曲霉、黑曲霉、灰绿曲霉和青霉的花生仁。而在所有的霉菌毒素中，众所周知的黄曲霉毒素是最危险的毒素之一，其急性毒性是氰化钾的10倍。黄曲霉毒素不是单一的化合物，而是一群结构十分相似的化合物。目前至少已经分离出17种化合物，其中黄曲霉毒素B1毒性最强，在毒素中占有主导地位，易导致癌病变，如肝脏细胞急速坏死、肝硬化、肝癌等。

多种霉菌毒素检测方法 防范于未然
      如何减少、控制霉菌毒素污染？普通的食物处理和烹饪方法不会减少黄曲霉毒素的含量，最佳方法是防止食品受污染或勿食用已污染的食品。而生产厂家在购进原料时就应该注意检测霉菌，以保证食品生产原料的安全、无毒。
      Hannes BINDER博士称，霉菌毒素大多出现在谷物、坚果类食品中。霉菌毒素的检测分为常规检测法和快速检测法，以黄曲霉毒素的检测为例，常规方法主要有生物鉴定法、化学分析法、仪器分析法、免疫分析法等，其中，生物鉴定法有细菌发光试验、荧光反应等约10种方法，化学分析法最常用的为薄层层析法（TLC），仪器分析法有高效液相色谱法（HPLC）等方法，免疫分析法有放射免疫法、亲和层析法、酶联免疫法（ELISA）等；新的快速检测法的有酶联免疫吸附法、荧光快速定量法、免疫层析法等，可以实现定性、半定量检测。
    薄层色谱法检测灵敏度低、重现差、操作繁琐、时间长且安全性差。高效液相色谱法是目前国内绝大多数检测机构都在使用的方法，虽然灵敏度高，但样品的前处理相对复杂，检测周期长、程序复杂、所需试剂繁多。ELISA法操作简便快速而且无污染，但易出现假阳、阴性结果。免疫亲和柱法优点很多，但检测费用过高。

对外贸易促进检测技术发展
     根据HACCP的要求，一般食品企业需要对原料和终产品进行霉菌毒素的检测，这也是有效控制霉菌毒素产生、避免其含量超标最有效的措施。一般来说，原料进厂时采用试剂盒进行快速检测，在终产品出厂时采用色谱法检测霉菌毒素。
     色谱法由于要在前处理后进行纯化和色谱分析，因此对实验室和样品前处理的要求比较高。在纯化阶段，有几种方法可供选择，如果需要获得精准度高的结果，Hannes BINDER博士推荐采用免疫亲和法，这种方法能够得到较好的特异性，但是存在一次只能获取一个或者少数的毒素检测结果。
     色谱法新的趋势是由欧洲进出口的苛刻要求引发的，食品企业需要做到同时检测多种毒素。一般国家对农产品和食品的霉菌毒素的限制主要是黄曲霉毒素，而欧洲要求检测包括黄曲霉毒素在内的7种毒素，而且限量要求更加苛刻。如欧盟对出口果汁就需要检测展青霉素。新的StarLingTMIAC进化柱一次少量进样即可同时检出89种毒素，其稳定性可达18个月，回收率大于等于95%，重复性小于等于5%，适用于多种萃取液，符合欧盟2002/26/EC指令要求。
     随着待测食品种类的扩大和食品基质成分的复杂化，来自食品中非测定成分的干扰越来越多，因此对试样净化、检测手段的要求越高。鉴于黄曲霉毒素的毒性及其易污染食品的特性，世界各国相继建立或正在改进检测该毒素的方法，理想的分析方法应该是简单、快速、准确、有效、灵敏、特异、经济、节省人力、物力等。国际上新的检测技术是在常规方法中引入了免疫学、生物化学、分子生物学技术，如金标法等。而快速检测方法则以试剂盒检测为代表。Hannes BINDER博士称，国际标准化的快速检测试剂盒已经成为了霉菌毒素快速检测的国际趋势。此类试剂盒根据国际贸易中食品安全国际标准要求设计，可以大大简化检测程序，省去大量的检测时间、人力和物力，并能够快速、准确地获得实验结果，为生产和产品出厂提供决策依据。
     罗马实验室最新推出的AgraStripTM总黄曲霉毒素快速检测试剂盒通过了美国USDA/GIPSA批准，可以实现在线快速检测。为适应不同国家的标准要求，该试剂盒的检测极限达到了4μg/kg、10μg/kg、20μg/kg。而且试剂盒结构紧凑，使用方便，重复性强，可以在5分钟内实现检测快速，判读结果。
    随着国内外对霉菌毒素引起的食品安全问题的重视和国际贸易的深入，出口易染霉菌毒素食品的企业，需要及时了解霉菌毒素检测的相关信息，并根据出口国家的相关要求选择适合的检测方法。

       本次采访得到新加坡罗马实验室区域市场行销主管陈丽敏女士和北京安普生化科技有限公司市场技术部经理张喆女士的大力支持，在此表示感谢。